T84人結(jié)腸癌細(xì)胞
細(xì)胞縮寫: T84細(xì)胞
細(xì)胞名稱: T84(人結(jié)腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細(xì)胞)
詳細(xì)背景: T84細(xì)胞株是從一位72歲男性結(jié)腸癌患者的肺轉(zhuǎn)移灶建立的可移植人類癌細(xì)胞株。腫瘤組織皮下接種于BALB/c裸鼠,并連續(xù)進(jìn)行移植。在裸鼠身上的移植過(guò)程中,細(xì)胞株始終保持結(jié)腸癌的原始組織性狀, 在無(wú)胸腺小鼠中傳代23代后建立了T84細(xì)胞株。這些細(xì)胞單層生長(zhǎng)到飽和并在接觸細(xì)胞間展現(xiàn)出緊密連接和橋粒。有很多關(guān)于多肽類激素和神經(jīng)遞質(zhì)并維持定向電解質(zhì)傳輸?shù)膱?bào)道。角蛋白免疫過(guò)氧化物酶染色陽(yáng)性。
細(xì)胞來(lái)源: 細(xì)胞主要來(lái)源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少數(shù)國(guó)內(nèi)外著名大學(xué)建系
"購(gòu)買細(xì)胞注意事項(xiàng):
1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們聯(lián)系。
2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。
3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼壁培養(yǎng);如果染色結(jié)果顯示細(xì)胞無(wú)活力,請(qǐng)拍下照片及時(shí)和我們聯(lián)系,信息確認(rèn)后我們?yōu)槟倜赓M(fèi)寄送一次。
4. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和公司技術(shù)部溝通交流。
包裝規(guī)格: 復(fù)蘇T25培養(yǎng)瓶(一瓶)或凍存1ml凍存管(兩支)
細(xì)胞規(guī)格: 1*10(5)/ml——1*10(6)/ml
安全水平: 1
細(xì)胞種屬: 人
組織來(lái)源: 疾?。航Y(jié)直腸癌;取材轉(zhuǎn)移灶:肺
細(xì)胞形態(tài): 上皮細(xì)胞樣
細(xì)胞特性: 貼壁
細(xì)胞融合度: 95%(Viability by Trypan Blue Exclusion)
細(xì)胞檢測(cè): 細(xì)胞不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌
T84人結(jié)腸癌細(xì)胞
細(xì)胞處理方法:
一、貼壁細(xì)胞
1、 接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、37度平衡1-2小時(shí)。
5、用移液管吸取培養(yǎng)基,到50ml離心管中,剩下細(xì)胞密度達(dá)到80%至90%可以傳代,如沒有達(dá)到添加6ml新鮮培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)。
6、如果肉眼檢查上清有細(xì)胞,對(duì)50ml上清進(jìn)行離心收集細(xì)胞,如果細(xì)胞連片狀態(tài),棄掉上清對(duì)收集的細(xì)胞進(jìn)行胰酶消化(1ml胰酶37度),接種培養(yǎng)。
二、懸浮細(xì)胞
1、接收到細(xì)胞,肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色,顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況,并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照(建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片,顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞 100X,200X 各一張)。
2、用 75%的酒精消毒外包裝,在超凈工作臺(tái)內(nèi)打開外包裝。
3、嚴(yán)格遵循無(wú)菌操作規(guī)范,打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4、細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管*吸出(嚴(yán)禁直接傾倒)。
5、1000rpm,5min 離心,用吸管小心吸出上清,加入培養(yǎng)基,重懸細(xì)胞。
6、將重懸好的細(xì)胞轉(zhuǎn)入六孔板或者細(xì)胞培養(yǎng)瓶種,加入新鮮培養(yǎng)基,置于 37℃,5%CO2 培養(yǎng)(大部分細(xì)胞)。